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怎樣操作ELISA試劑盒
點擊次數(shù):672 更新時間:2017-04-20
   ELISA試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是*的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點是:
  加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。
  試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。
  用于檢測未知抗體的間接法
  .用包被緩沖液將已知抗原稀釋至~0μg/ml,每孔加0.ml,4℃過夜;
  2.次日洗滌3次;
  3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌;
  4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.ml;
  5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;
  6.zui后一遍用DDW洗滌
  所以,有時候一份標(biāo)本用相同的elisa試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。

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